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組織在制作過程中由于化學試劑的作用封閉了抗原,又由于熱作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過程中不能將其顯示出來,為了解決上述的問題,利用化學試劑和熱作用將這些抗原重新暴露出來或修正過來的過程稱為抗原修復。檸檬酸鹽、EDTA、Tris等緩沖液在熱的條件下可以使被福爾馬林固定液屏蔽的抗原重新暴露出來,同時又不會對抗原表位造成破壞,從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高診斷的準確率。 抗原修復有多種方法,主要方法可簡要歸納為加熱修復和非加熱抗原修復兩大類;非加熱抗原修復方法包括酶消化、真空負壓、酸水解等方法。目前主要是酶消化法,酶消化是以化學的方法來打斷醛鍵,修復抗原,在免疫組織與免疫組織化學中有時經(jīng)福爾馬林等醛基固定液過度固定的標本,常會產(chǎn)生過量的醛基遮蓋抗原,影響一抗與抗原的結合。
Leagene高壓加熱法原理在于通過高壓、高熱來促進醛基的斷裂,當加熱至開鍋,該法常被用于較難修復的抗原,采用含水高壓煮沸法可增強福爾馬林的腦組織tau蛋白免疫反應性,采用高壓加熱法可以很好的避免假陽性、假陰性,使免疫組化染色效果更好。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。