服務(wù)介紹：

       測(cè)定植物根系活力時(shí)，以TTC為底物，保溫1~4小時(shí)，根系中脫氫酶能夠還原TTC并生成不溶于水的紅色TTF，再用有機(jī)溶劑(乙酸乙酯或丙酮等)將其從根中提取出來(lái)，用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀檢測(cè)485nm處吸光度，進(jìn)而計(jì)算出TTC的還原量，以該還原量表示脫氫酶活性，并作為植物根系活力的指標(biāo)，該試劑盒主要用于定量測(cè)定植物的根系活力或脫氫酶活性。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：

實(shí)驗(yàn)流程：

1. 檢測(cè)準(zhǔn)備工作：

1.1. TTF系列標(biāo)準(zhǔn)管配制：根據(jù)需要，進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)ɡ缦♂屩?5、50、100、150、200、400μg），與待測(cè)樣品進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)后，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法數(shù)據(jù)分析；

1.2.準(zhǔn)備樣品：取0.2~0.5g植物須根系，洗凈，用濾紙吸干，完全浸沒(méi)于TTC Assay buffer工作液中，37℃避光孵育1~3h，加入2ml TTC終止液終止反應(yīng)；同時(shí)做一空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即根系先完全浸沒(méi)于2ml TTC終止液以殺死根樣，再加入10ml TTC Assay Buffer工作液，37℃避光孵育1~3h。取出充分研磨或勻漿，以提取出TTF，把紅色提取液(TTF)轉(zhuǎn)移至離心管，并用少量乙酸乙酯把殘?jiān)礈?~3次，再將洗滌液一并轉(zhuǎn)移至離心管，最后補(bǔ)加乙酸乙酯至10ml，搖勻。

1.3測(cè)定：比色杯光徑1.0cm，系列標(biāo)準(zhǔn)管以“0”號(hào)管調(diào)零，測(cè)定1~5號(hào)管485nm的吸光度值；樣品管以空白對(duì)照組樣品提取液做參比，調(diào)零，以分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測(cè)定實(shí)驗(yàn)組樣品提取液在485nm的吸光度值。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運(yùn)輸要求：

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)

準(zhǔn)確稱(chēng)取動(dòng)物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定。

2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜（GLU檢測(cè)請(qǐng)勿全血樣本放置過(guò)夜取血清）后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)

可用肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

4、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來(lái)，將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞：將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清：標(biāo)本于2-8℃，3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗(yàn)，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！