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手動生化

服務詳情

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羥自由基清除率(檢測服務)

羥自由基清除率檢測試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測試劑盒或羥自由基檢測試劑盒,其檢測原理是H2O2/Fe2+ 通過Fenton反應產(chǎn)生羥自由基,并將Fe2+氧化為Fe3+,導致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無色的鄰二氮菲-Fe3+,使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失,可通過酶標儀測定530~540nm處吸光度的變化,據(jù)此可計算出羥自由基的含量變化,即可計算出樣品的羥自由基清除率或清除能力,主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。

價格:¥15.00

規(guī)格:反應

貨號:ST1015

品牌:LEAGENE

服務介紹:

羥自由基清除率檢測試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測試劑盒或羥自由基檢測試劑盒,其檢測原理是H2O2/Fe2+ 通過Fenton反應產(chǎn)生羥自由基,并將Fe2+氧化為Fe3+,導致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無色的鄰二氮菲-Fe3+,使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失,可通過酶標儀測定530~540nm處吸光度的變化,據(jù)此可計算出羥自由基的含量變化,即可計算出樣品的羥自由基清除率或清除能力,主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。

貨號

名稱

規(guī)格

價格

ST1015

羥自由基清除率檢測試劑盒

反應

15

實驗流程:

1、準備樣品:

植物樣品:取正常或逆境下的新鮮植物組織,清洗干凈,擦干,切碎,迅速稱取,按1~1.5g樣品:4.5ml 蒸餾水的比例勻漿或研磨,室溫靜置4h,離心取上清

血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可用于該試劑盒的測定

高活性樣品:如果樣品中含有較高濃度的羥自由基,可用蒸餾水進行恰當?shù)南♂尅?/span>

2、?OH加樣:按照下表設置空白管、未損傷管、損傷管、對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,然后,置各管于37℃水浴鍋保溫1h;如果樣品中的羥自由基(?OH)濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置平行管。

加入物(單位:ml)

空白管

未損傷管

損傷管

對照管

測定管

鄰二氮菲溶液

--

0.15

0.15

--

0.15

OH   Assay Buffer

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

亞鐵顯色液

--

0.1

0.1

--

0.1

蒸餾水

0.8

0.55

0.45

0.7

0.35

待測樣品

--

--

--

0.1

0.1

氧化劑

--

--

0.1

--

0.1

?OH測定:取96孔板,將各管溶液依次吸取250ul加至96孔板中,用酶標儀檢測530~540nm處各孔吸光度值,依次記為A0、A1、A2、A3`、A3

實驗結果:

全自動生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求:

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

4、細胞樣本

貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

細胞上清:標本于2-8℃,3000轉/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!

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